pcr實驗(yan)室建設的(de)要(yao)求

什么是pcr實驗室建設(she)的基本要求？

一、pcr實驗室建設的平面布置。

PCR擴增檢測實(shi)驗室原則上分(fen)為(wei)四個獨立的(de)工(gong)作(zuo)區(qu)(qu)：試(shi)劑(ji)儲存區(qu)(qu)及(ji)備用區(qu)(qu)，標本制(zhi)備區(qu)(qu)，擴增反應混(hun)合物(wu)配制(zhi)及(ji)擴增區(qu)(qu)。產物(wu)分(fen)析區(qu)(qu)。為(wei)了防止交叉污染(ran)，各工(gong)作(zuo)區(qu)(qu)域在(zai)進(jin)入時都(dou)是(shi)嚴格(ge)按(an)照(zhao)單一的(de)方向進(jin)行(xing)的(de)，即(ji)只(zhi)有試(shi)劑(ji)儲存區(qu)(qu)和(he)準備區(qu)(qu)→樣品制(zhi)備→擴增反應混(hun)合物(wu)的(de)配制(zhi)和(he)擴增產物(wu)分(fen)析區(qu)(qu)。在(zai)實(shi)驗區(qu)(qu)域間，應采用傳(chuan)送窗將試(shi)劑(ji)和(he)樣品傳(chuan)送。

二(er)、實驗室(shi)的空(kong)調和(he)通風系統和(he)壓力(li)控(kong)制設(she)計。

pcr實驗(yan)室建設沒有嚴格的凈化要求，但為了避免各試驗區之間可能出現交叉污染，建議采用全送全排氣流組織。與此同時，應嚴格控制送、排風量，保證各試驗區域的壓力要求。

1.樣(yang)品準備區域。

在這一(yi)地區(qu)主(zhu)要進行的操作是(shi)保存(cun)樣品.核酸(RNA.DNA)提(ti)取，儲存(cun)，儲存(cun)，添加(jia)到擴增反應(ying)管，檢測DNA合(he)成(cheng)。該地區(qu)的壓力(li)梯度要求是(shi)：對相鄰區(qu)域進行正壓，以避免相鄰區(qu)域內空氣中污(wu)染(ran)物的進入。此外，由于氣溶膠對環境(jing)(jing)的污(wu)染(ran)，在加(jia)樣過程(cheng)中應(ying)盡量避免對環境(jing)(jing)造成(cheng)不必要的污(wu)染(ran)。

2.試(shi)劑儲藏和準(zhun)備區域。

在(zai)實驗區(qu)(qu)域(yu)內(nei)，主(zhu)要進行了(le)試(shi)(shi)劑的配(pei)制(zhi)、試(shi)(shi)劑的分(fen)裝、主(zhu)反應混合物(wu)的制(zhi)備。試(shi)(shi)樣所用(yong)的試(shi)(shi)劑和物(wu)料(liao)必須(xu)直接運到區(qu)(qu)內(nei)，不能(neng)通過其它區(qu)(qu)域(yu)。在(zai)本區(qu)(qu)儲存(cun)試(shi)(shi)劑原料(liao)，并在(zai)本區(qu)(qu)內(nei)配(pei)制(zhi)成(cheng)所需儲存(cun)試(shi)(shi)劑。對于風壓(ya)的控制(zhi)，本地(di)區(qu)(qu)并無(wu)嚴(yan)格的要求。

3.產物分析(xi)的擴展領域(yu)。

在這一(yi)地(di)區(qu)(qu)(qu)(qu)，主要(yao)是對擴增(zeng)(zeng)片段的測(ce)定。該(gai)地(di)區(qu)(qu)(qu)(qu)是主要(yao)的擴增(zeng)(zeng)產物污染源，因此該(gai)地(di)區(qu)(qu)(qu)(qu)要(yao)求壓力(li)梯(ti)度(du)為(wei)負，以避(bi)免該(gai)地(di)區(qu)(qu)(qu)(qu)擴增(zeng)(zeng)產物從該(gai)地(di)區(qu)(qu)(qu)(qu)擴散到(dao)其他地(di)區(qu)(qu)(qu)(qu)。

4.反(fan)應(ying)混合(he)物的調(diao)配和擴展區域(yu)。

在(zai)(zai)這一地(di)區(qu)(qu)主要進行(xing)的(de)(de)是DNA擴增。另(ling)外，該區(qu)(qu)還可以(yi)將制(zhi)備(bei)的(de)(de)DNA模(mo)板(ban)(樣品處理區(qu)(qu))和主反(fan)應混合液(試劑(ji)貯藏和準備(bei)區(qu)(qu))制(zhi)備(bei)為反(fan)應混合液，等等。本地(di)區(qu)(qu)的(de)(de)壓力梯度要求是：在(zai)(zai)本區(qu)(qu)域內，采用(yong)負壓方式(shi)，避免本地(di)區(qu)(qu)氣溶(rong)膠泄漏(lou)。應盡量減少因氣霧劑(ji)造成的(de)(de)污(wu)染而不必要的(de)(de)出行(xing)。